Существующие методы определения концентрации креатинина делятся на следующие группы.
1. Колориметрические:
- основанные на реакции Яффе — реакция ароматических нитровеществ (пикриновая кислота) с веществами, содержащими активную метиленовую (=CH2) или метиновую (=СH–) группы. Методы отличаются по способу осаждения белков плазмы или сыворотки (вольфраматом натрия, пикриновой кислотой, трихлоруксусной кислотой). Методы этой группы недостаточно специфичны, поскольку в той же области спектра поглощают также неспецифические хромогены — пикраты пировиноградной кислоты, ацетоуксусной кислоты, ацетона, глюкозы, производных креатинина (глюкоциамид, 5‑метилкреатинин). Метод с осаждением белков при помощи пикриновой кислоты (метод Поппера) является наиболее точным, так как, вероятно, при этом часть креатиноподобных хромогенов удаляется.
- основанные на реакции креатинина с 3,5‑динитробензойной кислотой — окраска мало стабильна и метод применяется редко.
- с ортонитробензальдегидом, базируется на превращении креатинина в метил‑гуанидин. Метод весьма специфичен, но трудоемок и длителен в исполнении.
- с α‑нафтолом — в основе лежит реакция Сакагучи на аргинин: гуанидиновая группировка аргинина окисляется гипобромитом и аминокислота конденсируется с α‑нафтолом.
2. Ферментативные:
- с ферментом креатинкиназой — точен, но требует специальной аппаратуры.
- c использованием ферментов пируваткиназы, лактатдегидрогеназы — эти методы неспецифичны и дорогостоящи.
Унифицированным методом определения в сыворотке крови и моче является метод Поппера с соавт., основанный на реакции Яффе.
Определение концентрации креатинина в сыворотке крови методом Поппера
Принцип
Креатинин в щелочной среде дает цветную реакцию с пикриновой кислотой.
Нормальные величины
Сыворотка | дети | 27‑62 мкмоль/л |
подростки | 44‑88 мкмоль/л | |
женщины | 44‑88 мкмоль/л | |
мужчины | 44‑100 мкмоль/л | |
Суточная моча | 4,4‑17,7 ммоль/сут | |
Амниотическая жидкость | >177 мкмоль/л |
Влияющие факторы
Повышение содержания отмечается при употреблении мясной пищи и при усиленной физической работе. Ложное увеличение показателя может вызвать липемия и гемолиз, ложное снижение — желтуха.
Клинико‑диагностическое значение
Уровень креатинина не является чувствительным показателем заболевания почек в ранней стадии.
Сыворотка
Увеличение содержания креатинина вызывается острым и хроническим нарушением функции почек различного генеза, закупоркой мочевых путей, кишечной непроходимостью, выявляется при заболеваниях печени, голодании, также наблюдается при акромегалии и гипертиреозе.
Гипокреатининемия отмечается при уменьшении мышечной массы, во время беременности (особенно I и II триместры).
Моча
Увеличение концентрации креатинина может быть связано с повышенной физической активностью, с лихорадочными состояниями, отмечается при выраженной недостаточности функции печени, при сахарном диабете, инфекциях. Снижение обнаруживается при голодании, у больных с мышечной атрофией, с дегенерацией и амилоидозом почек, лейкемией.
Амниотическая жидкость
Накопление креатинина выявляется при беременности больных сахарным диабетом, преэклампсии.